Benzonase 核酸酶(科研實驗使用)
Benzonase核酸酶,是一種核酸內切酶,可將核酸降解成2~5個堿基的5‘單磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀)的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性,又被稱為“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白樣品粘度,去除蛋白樣品中核酸的污染,且無蛋白酶活性殘留,核酸酶活性達1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同時, 也具有多種其他用途,如:減少了樣品處理時間,增加了蛋白產量,離心時時沉淀和上清分離的更徹-底,更便于溶液的離心(尤其是超濾);提高色譜純化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四種,分別為不含任何標簽的Benzonase核酸酶(科研級別)、無內毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶(科研級別)和無內毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶,可適應不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除,而無內毒素的兩種Benzonase核酸酶,內毒素含量<40EU/mL(按照單位換算量計算為,每1000U中含有的內毒素<0.15EU),可適用于藥用級別的研發(fā)和生產。另外,核酸酶殘留可通過我公司開發(fā)的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒進行評測,15min即可完成檢測,-低可檢測到2ng/ml的核酸酶殘留。
單位定義
37℃,pH 8.0反應條件下,在30分鐘內使△A260 值降低1.0(相當于完-全消化37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
注意:含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品,對該酶活性有部分抑制作用,使用時需要增加酶的用量。
應用
蛋白提取時去除核酸污染:在重組蛋白純化或組織細胞樣品蛋白提取時,Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度,利于下游操作
與細胞或細菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白質產量
減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象
降解核酸,利于不可溶性蛋白復性前高質量包涵體制備
有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響,改善蛋白質的分離效果,增強2-DE分辨率
疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除